IMViC
IMViC试验是数个试验的集合。在微生物实验室中,时常用来鉴定大肠菌群(Coliform bacteria)。大肠菌群是革兰氏阴性菌,是好氧或兼性厌氧杆菌,会发酵乳糖并在48小时内产生气体。食物中若存在一些大肠菌群表示该食物受到粪便污染。
"IMViC"中每一个英文字母各代表了一种试验。"I"代表吲哚(indole)试验;"M"代表甲基红(methyl red)试验;"V"代表伏普(Voges Proskauer)试验;"C"代表柠檬酸盐利用(citrate utilization)试验。小写字母"i"只是代表in:柠檬酸盐利用试验中我们会把大肠菌群放到柠檬酸盐中(place "in Citrate")。
这些试验方便我们鉴定肠杆菌科(Enterobacteriaceae)。
吲哚试验
[编辑]在本试验中,我们将欲鉴定的微生物放到蛋白胨液态培养基(peptone water broth)中。该培养基含有色胺酸(tryptophan),可被色胺酸酶转变成吲哚,氨和丙酮酸。接着吲哚可以用二甲苯萃取出来。欲测试液态培养基中是否有吲哚产生,在培养细菌24小时后,我们加入柯瓦克试剂(Kovac' reagent),若在液体表面出现一层(粉)红色,这是阳性结果,表示有吲哚存在。
甲基红和伏普试验
[编辑]这两个试验共用同一管MRVP液态培养基即可。培养细菌24小时后,将一管分为两管,其中一管进行甲基红(MR)试验,另一管进行伏普(VP)试验。
甲基红试验用以检测细菌是否在代谢丙酮酸时使用混合酸路径(mixed acid fermentation)。甲基红是一种酸碱指示剂,在PH值小于4.2时成红色。若细菌走的是混合酸路径,会产生酸性代谢产物,故该培养管加入甲基红后会呈红色,是为阳性。若液态培养基仍维持黄色(PH值大于6.2),是为阴性,表示细菌走的是丁二醇发酵路径(butanediol fermentation)。
伏普试验用了1-萘酚和氢氧化钾去检测丁二醇发酵路径的中间产物:乙偶姻(acetylmethylcarbinol)。加入这两项试剂后,我们必须大力摇晃培养管,并等候5-10分钟。产生红色s是阳性的结果,表示细菌走的是丁二醇发酵路径。
柠檬酸盐利用试验
[编辑]本测试使用西蒙柠檬酸琼脂(Simmon's citrate agar),检测该微生物可否只用柠檬酸盐作为其唯一碳源。该琼脂含有柠檬酸盐、胺盐(作为氮源)和溴麝香草酚蓝(bromothymol blue)作为指示剂。在种菌以前,西蒙(Simmon’s) 柠檬酸琼脂是绿色的;若柠檬酸盐被利用了(阳性),将转为蓝色。
用途
[编辑]IMViC试验方便我们鉴定肠杆菌科,时常与尿素酶试验(Urease test)合并使用。下表列出一些重要菌种做IMViC试验的结果:[1]
物种 | 吲哚试验 | 甲基红试验 | 伏普试验 | 柠檬酸盐利用试验 |
---|---|---|---|---|
大肠杆菌 | + | + | - | - |
志贺杆菌 [2] | - | + | - | - |
沙门氏菌 | - | + | - | + |
克雷伯氏菌 | - | - | + | + |
普通变形杆菌 [3] | + | + | - | - |
奇异变形杆菌 | - | + | - | + |
弗劳地柠檬酸杆菌 | - | + | - | + |
产气肠杆菌 | - | - | + | + |