Milieu TCBS
Le milieu TCBS (ou Gélose TCBS ou milieu Thiosulfate Citrate Bile Saccharose) est un milieu de culture et d'isolement sélectif des bactéries du genre Vibrio.
Description
[modifier | modifier le code]Le milieu TCBS a été créé par Kobayshi en 1963 par une modification du milieu de Nakanishi[1],[2]. Il est aussi appelé gélose TCBS[3] ou milieu Thiosulfate Citrate Bile Saccharose[4]. C'est un milieu de culture qui permet l’isolement sélectif des vibrions entéropathogènes de par sa forte concentration en bile et en citrate associée à un pH élevé[1],[5]. Dans ces conditions, Vibrio cholerae et Vibrio parahaemolyticus se cultivent bien. L'espèce Vibrio cholerae qui est saccharose +, forme des colonies jaunes en 24h à 37°C[5],[3]. La croissance des entérocoques et des entérobactéries n’est cependant que ralentie[5]. Les colonies de Vibrio, saccharose+ et H2S– apparaissent jaunes sans centre noir.
Le milieu TCBS est toutefois moins efficace que le milieu MSA-B pour dénombrer les Vibrio totales[2].
Composition
[modifier | modifier le code](Formule en g/L d'eau distillée)[1],[2]
- Peptone...................................... 10 - Extrait de levure............................ 5 - Citrate de sodium............................ 10 - Thiosulfate de sodium........................ 10 - Chlorure de sodium........................... 10 - Bile de bœuf................................. 8 - Citrate ferrique............................. 1 - Saccharose................................... 10 à 20 - Bleu de bromothymol.......................... 0,04 - Bleu de thymol............................... 0,04 - Agar......................................... 14
pH final ~ 8,6
Caractéristiques
[modifier | modifier le code]- Base nutritive enrichie par des extraits de levure.
- Forte concentration d'inhibiteurs :
- citrate de sodium
- thiosulfate de sodium
- bile de bœuf dont la fonction est d'inhiber les bactéries à gram positif[3]
- Deux critères de différenciation :
- fermentation du saccharose (révélé par les indicateurs de pH),
- production d'H2S à partir du thiosulfate de sodium (révélé par le citrate ferrique).
- NaCl à concentration favorable pour les Vibrio.
- Le pH alcalin qui renforce l'effet sélectif et favorise la croissance des bactéries du genre Vibrio[3]
- Couleur finale du milieu : verte
Mode de lecture
[modifier | modifier le code]La fermentation du saccharose se traduit par un virage au jaune de la colonie[5],[3].
- Colonie jaune : bactérie saccharose +
- Les colonies deviennent jaunes grâce à l'acidification du milieu par fermentation du saccharose => saccharose +
- c'est le cas de Vibrio cholerae, Vibrio fluvialis, Vibrio alginolyticus et Vibrio anguillarum[5]
- Colonie verte : bactérie saccharose -
- Ces colonies restent bleues ou vertes car il n'y a pas d'acidification du milieu sans fermentation du saccharose
La production d'H2S se décèle grâce au noircissement du centre de la colonie[3].
- Colonie à centre noir : H2S +
- les bactéries capables de former de sulfure d’hydrogène à partir de thiosulfate de sodium ont un centre noir et sont H2S +
- Colonie sans centre noir : H2S –
- incapables de former du sulfure d'hydrogène, ces bactéries n'auront pas de centre noir sur leurs colonies et sont H2S –
Indications
[modifier | modifier le code]Les bactéries du genre Vibrio, contrairement aux autres bactéries, se développent facilement sur ce milieu sans jamais produire d'H2S. Vibrio cholerae se repère grâce à ses colonies jaunes.
Notes et références
[modifier | modifier le code]- Cet article est partiellement ou en totalité issu de l'article intitulé « Thiosulfate Citrate Bile Saccharose » (voir la liste des auteurs).
- (ja) T Kobayashi, S Enomoto, R Sakazaki et S Kuwahara, « A new selective isolation medium for the Vibrio group » [« A new selective isolation medium for the Vibrio group; on a modified Nakanishi's medium (TCBS agar medium) »], Nihon Saikingaku Zasshi, vol. 18, , p. 387-92 (DOI 10.3412/jsb.18.387.)
- (en) Nicky B. Buller, « TCBS cholera medium (TCBS) », dans Bacteria and Fungi from Fish and Other Aquatic Animals, CABI, , 881 p. (ISBN 9781845938055)
- « Gélose TCBS », sur Microbiologie Médicale
- (en) G.D.W. Curtis, J.E.L. Corry et R.M. Baird, « 5. Plating agars for Vibrio cholerae », dans Culture Media for Food Microbiology, Elsevier Science, , 490 p. (ISBN 9780080530123)
- Denis et et al 2016, p. 328.
Voir aussi
[modifier | modifier le code]Bibliographie
[modifier | modifier le code]- François Denis, Marie-Cécile Ploy, Christian Martin et Vincent Cattoir (ill. Carole Fumat), Bactériologie médicale : techniques usuelles, Issy-les-Moulineaux, Elsevier Masson, , 3e éd., 575 p. (ISBN 9782294746161).
